甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备

摘要：

甘薯褪绿斑病毒(Sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)是侵染甘薯的主要病毒之一.本研究利用RT-PCR方法克隆了SPCFV中国4个分离物的外壳蛋白(CP)基因.序列分析表明,cp基因全长900bp,编码299个氨基酸残基.4个分离物cp基因的核苷酸序列一致性为78.3％～ 89.9％,推导的氨基酸序列一致性为91.3％～95.7％,存在较大的分子变异.不同分离物CP氨基酸序列N末端的第3-32位氨基酸为多变区.将四川分离物的cp基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,cp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达.以表达的蛋白为抗原免疫家兔,制备了SPCFV CP的特异性抗血清.ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清效价达1∶128 000,可用于田间甘薯样品的检测.

关键词：甘薯褪绿斑病毒、外壳蛋白、分子变异、原核表达、抗血清制备

所属期刊栏目：44

分类号：S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：国家甘薯产业技术体系建设项目CARS-11-B-07;河南省农业科学院财政预算项目资助

在线出版日期：2015-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：634-640