番茄黄化曲叶病毒V2基因原核表达及多克隆抗体制备

摘要：

通过PCR的方法,从番茄黄化曲叶病毒江苏分离物DNA中扩增到V2基因,并克隆到pMD18-T载体,序列测定结果显示其与报道的XH2分离物序列完全一致,核苷酸序列全长351 bp,编码115个氨基酸,推测分子量约13 kD.将该V2基因亚克隆到原核表达载体PET32a中获得重组表达载体PET32a-V2,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG可诱导1个分子量约为32 kDa的融合蛋白(含His标签)表达,经Ni+ NTA亲和柱纯化,获得纯化的重组蛋白,免疫家兔制备TYLCV-V2蛋白的多克隆抗体Anti-V2,间接ELISA测定Anti-V2的效价达1∶655 360,Western blot及DIBA分析结果表明Anti-V2可与V2蛋白发生特异血清反应,可为进一步研究V2蛋白的功能提供参考.

关键词：番茄黄化曲叶病毒、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：43

分类号：S436.412;S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：公益性行业农业科研专项201003065;国家自然科学基金资助项目31100366;江苏省农业科技自主创新项目CX10415;江苏省自然科学基金资助项目BK2011270

在线出版日期：2013-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：143-148