香蕉条斑病毒LAMP快速检测方法的建立

摘要：

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification/LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术.本研究以香蕉条斑病毒(Banana streak virus,BSV)ORF3保守区域为基础针对6个特定区域设计并筛选了4条LAMP扩增引物,通过对LAMP反应中MgSO4、dNTPs、Betaine等主要试剂浓度进行优化,建立了香蕉BSV的LAMP检测方法,63℃反应90 min后通过在反应产物中添加SYBR Green Ⅰ染料后颜色的变化,肉眼即可判断检测结果.LAMP具有极高的检测特异性和灵敏性,其检测下限约为3.2 ng·μL-1,是PCR检测灵敏度的25倍,能快速、准确地对疑似样品进行检测,本研究对华南地区部分疑似样品的检测结果显示LAMP阳性检出率比PCR检出率高.本文建立的BSV LAMP检测方法是对BSV检测方法的拓展和延伸,为香蕉病毒的快速检测提供技术保障.

关键词：香蕉条斑病毒、环介导等温核酸扩增技术、检测

所属期刊栏目：42

分类号：S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：中国农业部农业公益性行业科研专项200903049;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费2009hzslJ007

在线出版日期：2013-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：577-584