啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测

摘要：

根据啤酒花潜隐类病毒(HpLVd)各分离物基因序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对HpLVd的实时荧光RT-PCR检测方法.通过对反应体系的优化,确定了HpLVd的实时荧光RT-PCR最佳反应条件:Mg2+终浓度为5.5 mmol/L,引物终浓度为0.7μmol/L,探针终浓度为0.5μmol/L.灵敏度对比试验结果显示,实时荧光RT-PCR的灵敏度较普通RT-PCR通过琼脂糖凝胶电泳高10倍,在25 μL反应体系中,总RNA含量达到20 pg就能通过实时荧光RT-PCR检测出来.此方法也能成功检测田间样品上的啤酒花潜隐类病毒.

关键词：啤酒花潜隐类病毒、实时荧光RT-PCR、检测、TaqMan-MGB探针

所属期刊栏目：42

分类号：S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：国家质检总局课题2009IK256, 2011IK169;国家"973"课题2011CB932800;宁波检验检疫局科研项目甬K07-2011;国家标准制修订计划项目20100455-T-469

在线出版日期：2013-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：466-473