利用RNAi介导的抗病性获得抗2种花生病毒的转基因烟草

摘要：

分别以花生条纹病毒红安株系(PStV-Hongan)外壳蛋白基因(CP),花生矮化病毒轻型株系(PSV-Mi)和花生黄瓜花叶病毒(CMV-CA)复制酶基因2a为模板,通过PCR方法分别得到PStV-CP 5’端,PSV-Mi和CMV-CA2a 3’端150 bp的片段,3种片段混合物为模板经PCR拼接得到450 bp的片段,此拼接片段通过Gateway系统重组至植物表达载体pK7GW1WG2,得到含反向重复拼接片段的植物表达载体pK450.冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株GV3101后,叶盘法转化本生烟(Nicotiana benthamiana),经PCR检测,获得转基因植株.对T1代转基因植株分别人工接种3种病毒,66.7％的植株表现对PStV免疫,9％的植株表现对CMV-CA的恢复抗性,全部植株对PSV感病.siRNA的Northern blot结果表明,所有转基因烟草植株都含有病毒特异siRNA,siRNA含量随接种后时间延长而衰减.

关键词：转基因烟草、花生条纹病毒、花生矮化病毒、花生黄瓜花叶病毒、抗性

所属期刊栏目：42

分类号：S432.23(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金30871626

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：37-44