水稻瘤矮病毒S11基因沉默抑制子的原核表达及抗血清制备
以采自广东省水稻瘤矮病的典型病株为材料,通过RT-PCR法扩增和克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)Sll组分核苷酸序列全长.序列分析结果表明,RGDV广东分离物Sll(登录号EF532326)核苷酸序列全长1 168 bp,含有一个1 068 bp的开放阅读框,编码一条355个氨基酸的多肽,推测分子量约40 kD,与泰国分离物基因结构基本一致,其核苷酸与氨基酸序列相似性分别为94.3%和98.8%.将广东分离物SII基因克隆至pBV221温敏表达载体上,在大肠杆菌DH5α中实现了高效表达.以诱导蛋白为抗原免疫家兔获得了抗血清.利用ELISA法测定抗血清的效价为1:4 096,Western blot分析结果表明,抗血清能与Sll蛋白发生特异血清学反应.这可为进一步研究Sll蛋白的结构和功能,揭示其抑制基因沉默的作用机制提供参考.
水稻瘤矮病毒、基因沉默抑制子、原核表达、抗血清制备
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S432.41(病虫害及其防治)
国家自然科学基金资助项目30771407,30370929;广东省自然科学基金资助项目C036845
2011-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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