应用real-time PCR定量检测小麦条锈菌潜伏侵染量方法的建立

摘要：

小麦条锈病是我国小麦主要病害之一.快速、及时地诊断与定量监测处于潜育状态下的病叶,对准确估计越冬、越夏后的病情,制定正确的防治方案具有重要的意义.根据小麦条锈菌Puccinia striiformis的β-tubilin基因序列设计对该病原菌的种具有特异性的引物betaf/betar,并分别在普通PCR和real-time PCR扩增时对该引物的特异性和灵敏性进行了测定.结果表明该引物对小麦条锈菌特异性高,可稳定扩增出243 bp的目标条带.Real-time PCR的灵敏度为普通PCR的100倍.应用此特异性引物,建立了real-time PCR测定系统,定量测定了条锈菌在小麦叶片接种后组织内的DNA随时间的变化.结果表明,在接种后12 h,可在小麦叶片内检测到条锈菌,且条锈菌在小麦叶片内潜育期间随时间呈指数增长.接种第6 d后叶片内的菌量有明显的增加.建立的小麦条锈菌的real-time PCR早期定量测定方法,为及时、快速监测小麦条锈病在潜育期间的发病规律以及为该病的预测、防治提供依据.

关键词：小麦条锈病、潜伏侵染、real-time、PCR、分子流行学

所属期刊栏目：40

分类号：S43;S4

资助基金："973"项目2006CB100203;"十一五"科技支撑计划项目2006BAD10A01,2006BAD08A01;公益性行业科研专项200903035,200903004;教育部外专项目2008P010

在线出版日期：2010-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：504-510