4种葡萄卷叶伴随病毒多重RT-PCR检测
葡萄受卷叶伴随病毒侵染后,树势减弱,抗逆性变差,果穗着色不良,成熟期推迟,含糖量降低.目前已报道11种葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV).为提高检测效率,降低检测费用,本文在研究单个卷叶伴随病毒RT-PCR检测技术基础上,对4种葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR模板浓度、引物浓度和退火温度进行优化,建立了同时检测葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)、葡萄卷叶伴随病毒-4(GLRaV-4)和葡萄卷叶伴随病毒5(GLRaV-5)的多重RT-PCR技术体系.模板浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度、退火温度和循环次数对多重RT-PCR检测结果均有较大影响,而在一定范围内改变延伸时间和dNTP浓度对检测结果影响较小.对4种葡萄卷叶伴随病毒的PCR产物进行克隆和测序,扩增基因片段与GenBank中登录的基因序列同源性为95%～99%.所建立的多重RT-PCR技术检测田间样品效果良好.
葡萄卷叶伴随病毒、多重RT-PCR、检测技术
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S432.41(病虫害及其防治)
现代农业产业技术体系专项资金资助nycytx-30;农业部公益性行业科研专项nyhyzx07-027
2010-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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