双重PCR检测马铃薯晚疫病菌和青枯病菌方法的建立及应用

摘要：

利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增马铃薯晚疫病菌转录间隔区并进行序列测定,通过序列比较,设计了1对马铃薯晚疫病菌的特异引物INF1/INF2,并对15种不同真菌、细菌和7种疫霉属和腐霉属卵菌基因组DNA进行PCR扩增,结果只有不同来源的马铃薯晚疫病菌株可获得324 bp的特异带.将引物INF1/INF2与卵菌通用引物进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达30 fg.运用设计的引物与马铃薯青枯病菌特异引物结合建立了双重PCR体系,能从马铃薯晚疫病菌和马铃薯青枯病菌总基因组DNA以及人工接种和自然发病的马铃薯植株中分别或同时扩增到324 bp和281 bp的特异片段.实现了同时对马铃薯晚疫病菌和马铃薯青枯病菌的快速可靠检测.

关键词：晚疫病菌、青枯病菌、双重PCR、分子检测

所属期刊栏目：39

分类号：S188(农业生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目30600401;福建省科技重点项目2008N0029;福建省农业科学院科技创新团队建设基金STIF-Y07;农业部公益性行业农业科研专项3-20;福建省属公益类科研院所基本科研专项2009R10028-3

在线出版日期：2010-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：578-583