10.3321/j.issn:0412-0914.2008.05.009
南方根结线虫促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因的RNAi效应分析
促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在线虫的生长发育等方面具有重要作用,本研究探索利用RNAi技术沉默南方根结线虫mapk-1基因来抑制线虫的生长发育.根据mapk-1基因的cDNA序列设计引物,通过体外转录合成约550 bp的dsRNA对南方根结线虫的卵进行RNAi以沉默mapk-1基因.试验结果表明,将南方根结线虫的卵块浸泡在含有2 mg/mL dsRNA的M9缓冲溶液中,24 h后卵块孵化出的2龄幼虫数量明显多于对照组(无dsRNA),但孵化出的幼虫死亡率高达90%,而对照组的死亡率低于5%,说明mapk-1基因的沉默抑制了卵块的孵化和线虫的生长,同时将孵化的幼虫接种番茄,14 d后番茄根部无根结产生,35 d后无卵块产生;而浸泡72 h后卵块孵化出的2龄幼虫几乎全部死亡,并且孵化的线虫数量明显少于对照.提取导人 dsRNA的卵块的RNA进行半定量PCR分析,结果表明mapk-1基因的mRNA被降解.
南方根结线虫、卵块、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、RNAi
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S432.45(病虫害及其防治)
国家自然科学基金资助项目30571261,30270236;"十一五"国家高技术研究发展计划课题2006AAl0Z1119;重大基础研究前期研究专项2004CCA05300;农业公益性行业科研专项经费项目nyhyzx07-050
2009-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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