马铃薯腐烂茎线虫特异性分子检测技术研究

摘要：

本研究利用通用引物(rDNA1/rDNA2)研究了21个国内甘薯茎线虫(Ditylenchus destructor)群体和1个韩国马铃薯茎线虫(D.destructor)群体的rDNA-ITS序列,从21个国内群体中扩增出2个大小不同的ITS片段,分别约为940 bp和1 100 bp;经克隆、序列测定和分析比对发现其ITS区存在特异性差异,分别命名为A型和B型,其中18个群体DdTH、DdCL、DdJN、DdMYl,EMYXl,DdZZ、DdLN,DdDXl,IMHq,DdYX2,DDSXl、IMDX2,DdXY、DdLL、DdSX2、DdLY、DdMY2和DdPY的ITS扩增产物约为940 bp,称之为A型马铃薯腐烂茎线虫(940 bp),3个群体DdSH,DdTS,DdYS为B型马铃薯腐烂茎线虫(1 100 bp).设计构建并筛选出A型和B型马铃薯腐烂茎线虫2对特异性引物DdS1/DdS2和DdL1/DdL2,分别扩增出A型马铃薯腐烂茎线虫、B型马铃薯腐烂茎线虫群体的特异片段252 bp和485 bp;引入D3A/D3B作为内标,设计出一步双重PCR检测技术;同时优化了检测体系和PCR反应程序.该技术具有较高的特异性和灵敏性,能快速、准确地检测出不同型的马铃薯腐烂茎线虫群体.

关键词：马铃薯腐烂茎线虫、双重PCR、特异性引物

所属期刊栏目：38

分类号：S432.45(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金资助项目3037唧;国家"973"计划2002CB111400;"十一五"国家科技支撑计划项目2006BAD08A15,2006BAD00A14

在线出版日期：2009-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：263-270