松材线虫Hsp70基因的克隆与原核表达
热激蛋白70(Hsp70)是已知热休克蛋白家族中最重要的一种,它在细胞内的大量表达可以明显改善细胞的生存能力,提高对环境胁迫或伤害的耐受性.采用RACE-PCR技术,从松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)中克隆了Hsp70基因的全长cDNA序列(共2 061 bp)(GenBank登录号为:DQ785812).其编码一个分子量为70 kD的642个氨基酸的蛋白序列,含有3段Hsp70家族的签名序列.同源性分析表明,氨基酸序列与其它真核生物的Hsp70序列具有很高的相似性,并与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)热激蛋白70家族中的hsp-1基因编码的氨基酸序列更为相似.因此,将克隆的松材线虫Hsp70基因命名为Bx-hsp-1.构建了一个原核表达载体Bx70pEASY-E1,当IPTG终浓度为0.4~0.8 mmol/L时,能诱导表达融合蛋白.Bx-hsp-1基因的克隆和表达,将为松材线虫的生态适应性机理研究奠定基础.
松材线虫、热激蛋白70、Bx-hsp-1、RACE、表达
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S432.45(病虫害及其防治)
国家重点基础研究发展规划项目2002CB111401;科研院所社会公益性研究专项2004DIB3J096;国家基础条件平台项目2003DIB3J108
2008-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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