小麦条锈菌cDNA文库构建和表达序列标签(ESTs)分析

摘要：

小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)是全世界范围内小麦生产上的重要病原真菌,但是对小麦条锈菌的基因组和基因功能却了解甚少.为了促进小麦条锈菌基因组学的发展和大规模基因发现,我们以噬菌体λTriplEx2为载体,采用SMART技术构建了小麦条锈菌萌发夏孢子的cDNA文库.原始文库的滴度为1.1 ×106 pfu/mL,平均插入片段长度为750 bp.从文库中随机挑取279个cDNA克隆测序,分析发现这些ESTs的平均GC含量为45.08%.通过聚类分析,279个ESTs拼接成31个contigs和80 singletons.BLASTx分析表明,47%的ESTs与GenBank中报道的功能已知或未知蛋白具有相似性.tBLASTx分析表明12个uniseqs与EST数据库中的序列具有相似性,其中9个是来自担子菌的cDNA文库.几个EST与已知的真菌致病相关基因具有高度相似性.RT-PCR分析了几个基因在小麦条锈菌侵染过程中的表达水平.这些结果为小麦条锈菌夏孢子萌发以及侵染寄主过程中的基因表达研究奠定了很好的分子生物学基础.

关键词：cDNA文库、表达序列标签(ESTs)、基因表达、萌发夏孢子、小麦条锈菌

所属期刊栏目：37

分类号：S435.121.42(病虫害及其防治)

资助基金：The National Basic Research Program of China200611 D100203;The Program for Changjiang Scholars and Innovative Research Team in University, Ministry of Education of China200558;The Cultivation Fund of the Key Scientific and Technical Innovation Project, Ministry of Education of China2004-295;The National Nature Science Foundation30671350;111projectB07049

在线出版日期：2008-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：487-499