实时荧光RT-PCR一步法检测苹果茎沟病毒

摘要：

根据苹果茎沟病毒(ASGV)各分离物外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对ASGV的实时荧光RT-PCR检测方法.TaqMan-MGB探针3'端具有小沟结合分子(Minor groove hinder,MGB),提高了探针的Tm值,缩短了探针长度,解决了病毒各分离物之间基因组变异较大、难以找到较长一致的序列来设计探针的困难.该方法的检测灵敏度比常规RT-PCR电泳检测高约10倍,对于ASGV等在果树体内含量较低的病毒尤为适用.此方法快速、灵敏,整个检测过程完全闭管,无需PCR后处理.

关键词：苹果茎沟病毒(ASGV)、实时荧光RT-PCR、检测、TaqMan-MGB探针

所属期刊栏目：36

分类号：S436.611.1(病虫害及其防治)

资助基金：教育部全国优秀博士学位论文作者专项基金200253

在线出版日期：2007-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：57-61