10.3321/j.issn:0412-0914.2003.05.009
毕赤酵母Mut+和Muts重组子表达美洲商陆抗病毒蛋白基因的比较
将N末端信号肽和C末端毒性区域缺失突变的美洲商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral protein,PAP)基因表达载体pPIC9K-P酶切线性化后,通过电击转化整合到巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115菌株细胞中,PCR筛选出表型为利用甲醇快速型(Mut+)的重组子.在相同培养条件下比较Mut+重组子和利用甲醇缓慢型(Muts)重组子在表达缺失突变型PAP方面的异同.结果表明,诱导培养48 h后,Mut+重组子表达产物在SDS-PAGE胶上可见清晰目的带,而Muts重组子培养72 h才能见到微弱的目的带.抗病毒活性实验表明Mut+重组子和Muts重组子的表达产物均对TMV病毒侵染有明显的抑制作用,它们的抗病毒活性没有显著的差异.
美洲商陆抗病毒蛋白、毕赤酵母、表达、Mut+重组子、Muts重组子
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S188;S432.2(农业生物学)
国家烟草专卖局资助项目1102002010;国家科技攻关项目2001BA509B04
2007-03-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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