两种分子技术检测松木中松材线虫的效果评价

摘要：

为更好地解决当前松材线虫Bursaphelenchus xylophilus检测工作中频现的假阴性问题,通过不同分子技术检测效果的比较评价,摸索出了一套可提高松材线虫检测准确性的技术体系.针对早期感病松木的低线虫量,建立了线虫的最大量分离方法和基于rDNA ITS序列的分子检测体系,该体系可高效检测出单条松材线虫,准确率达93.75％.以来自浙江省不同疫区的96份松木样品为检测材料,比较了SCAR标记和ITS序列2种分子检测技术的阳性率.结果显示,通过首次PCR,ITSⅠ和ITSⅡ序列的检测阳性率分别为52.08％和55.21％,SCAR标记的检测阳性率为30.21％;通过第二次或巢式PCR,ITSⅠ和ITSⅡ序列的检测阳性率提高到了97.92％和100.00％,SCAR标记的检测阳性率提高到了59.38％,表明基于ITS序列的检测阳性率明显高于SCAR标记,且通过第二次或巢式PCR方法可进一步提高检测灵敏度,降低假阴性率.因此,通过线虫的最大量分离并基于rDNAITS序列的分子检测可明显提高检测准确性,更适用于松材线虫的常规检测.

关键词：松材线虫、松木、SCAR标记、rDNA ITS

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资助基金：浙江省林业有害生物普查资助项目2017TF020;浙江省松材线虫病检疫鉴定资助项目2017TF012

在线出版日期：2019-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1335-1341