甘蔗赤条病菌巢式PCR检测

摘要：

甘蔗赤条病是由燕麦食酸菌燕麦亚种(Acidovorax avenae subsp.avenae,Aaa)引起的一种世界性甘蔗细菌病害.为建立Aaa快速、灵敏的检测技术,根据该病菌16S～23S核糖体基因及其转录间隔区ITS分别设计2对特异性引物,建立Aaa巢式PCR检测方法.结果表明,建立的巢式PCR方法对Aaa标准菌株、水稻食酸菌A.oryzae具有特异性,可扩增出454 bp目的条带,对近缘种德氏食酸菌A.delafieldii及其它科属的红色雷夫松氏菌Leifsonia rubra和甘蔗宿根矮化病菌L.xyli subsp.xyli未扩增出任何条带.以感染Aaa的甘蔗叶片总DNA、含ITS靶标片段的质粒DNA标准品及Aaa标准菌液为模板,巢式PCR灵敏度最低检测限分别为10 fg/μL、10拷贝/μL和36 CFU/mL,是常规PCR灵敏度的1 000倍.应用巢式PCR和常规PCR对14份有赤条病症状的田间甘蔗叶片样品进行平行检测,阳性检出率分别为100.0％和28.6％,表明巢式PCR比常规PCR检测方法具有更高的灵敏度.本研究建立的巢式PCR方法适合于田间甘蔗赤条病害的分子检测与鉴定.

关键词：甘蔗赤条病、燕麦食酸菌燕麦亚种、巢式PCR、分子检测

所属期刊栏目：44

分类号：R44;TP2

资助基金：国家现代农业产业技术体系CARS-20-2-4

在线出版日期：2017-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：276-282