烟粉虱MED隐种气味结合蛋白OBP8的克隆、原核表达及与植物挥发物的结合特性

摘要：

烟粉虱为重要的入侵性经济作物害虫,对入侵地寄主植物存在选择性和偏好性.为明确烟粉虱气味结合蛋白(odorant binding protein,OBPs)的相关特性,通过克隆其OBP8基因BtabOBP8,进行同源基因进化关系分析,构建原核表达载体诱导表达重组蛋白,并利用基于荧光探针N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)的荧光竞争结合试验测试了BtabOBP8与不同寄主植物挥发物的结合功能.结果表明,BtabOBP8基因的开放阅读框全长480 bp,编码159个氨基酸,与半翅目其它害虫的OBP8基因进化关系较远.BtabOBP8蛋白重组后,4种化合物即β-紫罗兰酮、月桂烯、柠檬烯和P-伞花烃将1-NPN的相对荧光强度降低到50％以下,其中β-紫罗兰酮和月桂烯与BtabOBP8的结合能力最强,解离常数分别为13.32 μmol/L和21.53μmol/L.表明β-紫罗兰酮和月桂烯与BtabOBP8具有良好的亲和力,推测BtabOBP8对β-紫罗兰酮和月桂烯的识别可能参与了烟粉虱对绿色开花植物的吸引和选择作用.

关键词：烟粉虱、气味结合蛋白8、基因克隆、原核表达、植物挥发物竞争结合

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资助基金：国家自然科学基金31471773,北京市叶类蔬菜创新团队建设BLVT-13,国家科技支撑计划2012BAD19B00

在线出版日期：2016-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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