不同引物PCR检测向日葵黑茎病菌的灵敏度比较及应用

摘要：

为准确快速筛查进境油葵种子中携带的向日葵黑茎病菌Plenodomus lindquistii,采用常规PCR方法比较了3对向日葵黑茎病菌PCR检测引物320FOR/320RVE、LEPB/LEPF和LLF/LLR的灵敏度,对哈萨克斯坦进境120批油葵种子样品进行PCR检测,并对检测为阳性的样品进行产物序列测定及病原菌分离.结果显示,引物320FOR/320RVE的检测灵敏度最高,可达10-5ng/μL,引物LEPB/LEPF和LLF/LLR分别为10-4 ng/μL和10-3ng/μL.利用引物320FOR/320RVE、LEPB/LEPF和LLF/LLR对120批进境油葵种子样品进行检测,阳性检出率分别为65％、50％和45％,阳性检出率高低与引物的检测灵敏度相一致.阳性样品扩增的产物序列与GenBank中向日葵黑茎病菌的序列同源性最高;分离的病原菌菌落为乳白色至灰白色,分生孢子器黑褐色、球形并产生透明状分生孢子液,分生孢子单胞、无色、肾型、两端有油球,与已报道的向日葵黑茎病菌的病原特征描述一致,初步鉴定哈萨克斯坦进境油葵种子中存在向日葵黑茎病菌.

关键词：向日葵黑茎病菌、PCR检测、灵敏度

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资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金201318101-20

在线出版日期：2016-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：801-805