运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段

摘要：

为获得与毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)高亲和力的特异性多肽,利用丁基硼酸封闭法制备DON人工抗原DON-HG-BSA,以其为靶分子筛选噬菌体肽库,对阳性克隆进行DNA序列测定与氨基酸推导,并进行亲和特异性验证.结果显示,经过4轮亲和肽段筛选与酶联免疫检测法鉴定,从M13噬菌体随机7肽库中得到15个DON人工抗原包被孔与牛血清白蛋白包被孔OD比值大于3.8的阳性克隆,其中10个与DON人工抗原高亲和力结合的阳性克隆经测序后共推导出4种多肽序列.经抗原梯度酶联免疫检测法验证,多肽MAPGWVP与DON人工抗原浓度的相关性高达0.99,对人工抗原具有高亲和力.该多肽的获得将为进一步开发高效的DON诊断试剂盒奠定基础.

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、噬菌体展示随机肽库、酶联免疫检测、小麦赤霉病

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资助基金：国家公益性行业农业科研专项201303016,江苏省科技支撑项目BE2012306,江苏省自主创新项目CX114035

在线出版日期：2015-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：194-200