Cry1Ac的绿色荧光蛋白GFP标记及其在棉铃虫幼虫中肠的定位分布

摘要：

为了明确Cry1Ac蛋白在棉铃虫体内与中肠组织的相互作用,采用重叠PCR方法将Btcry1Ac基因和绿色荧光蛋白GFP基因融合,构建含Cry1Ac毒蛋白和绿色荧光蛋白GFP原核表达载体,并在大肠杆菌大量表达.利用荧光显微镜观察发现,表达Cry1Ac-GFP融合蛋白的大肠杆菌在蓝光激发下发出绿色荧光.将含有融合蛋白的菌液拌入人工饲料饲喂3龄棉铃虫幼虫96 h,取棉铃虫幼虫中肠做冰冻切片并在荧光显微镜下观察.结果显示,取食含有Cry1Ac-GFP融合蛋白饲料的棉铃虫幼虫中肠能够发出强烈荧光.比较Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性棉铃虫幼虫中肠的发光部位,敏感棉铃虫幼虫的中肠围食膜已经消失,肠壁细胞发出强烈的荧光,而抗性棉铃虫的围食膜较健全并发出荧光.

关键词：Cry1Ac毒蛋白、绿色荧光蛋白GFP、重叠PCR、定位分布

所属期刊栏目：34

分类号：S4(植物保护)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2007CB109202;国家高技术研究发展计划863计划2006AA02Z189

在线出版日期：2008-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：455-460