基于重组酶聚合酶扩增技术的玉米矮花叶病毒快速检测方法的建立

摘要：

玉米ZeamaysL.是重要的粮饲兼用作物.重要检疫性病毒玉米矮花叶病毒maize dwarf mosaic virus(MDMV)一直威胁玉米生产,为预防外来有害生物入侵,本研究以玉米可能携带的MDMV为目标,根据MDMV外壳蛋白(coat protein,CP)保守基因序列,基于重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),设计了 3对RPA引物,筛选并优化了反应体系,建立了 MDMV的快速检测方法,最终的RPA反应体系中引物终浓度为0.4 μmol/L,反应温度为42℃,反应时间为20 min.该方法可特异性检测MDMV,对MDMV CP阳性质粒样品的检测灵敏度可以达到105拷贝/μL(≈369 fg/μL),高于RT-PCR的检测灵敏度.该方法具有快速准确等优点,可用于玉米种子或植株中携带MDMV的检测.

关键词：玉米矮花叶病毒、重组酶聚合酶扩增、检测

所属期刊栏目：48

分类号：S435.131.4(病虫害及其防治)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;海关总署项目;中国博士后科学基金

在线出版日期：2022-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：83-89