九香虫i型溶菌酶基因的克隆与细菌诱导表达分析

摘要：

溶菌酶是一组进化上保守的酶,在昆虫中主要分为c型和i型两类.为明确i型溶菌酶在九香虫Coridius chinensis体内的表达模式与功能,我们对九香虫的两个i型溶菌酶基因CcL ys-i1和CcLys-i2进行了克隆,这两个基因的编码区分别为504 bp和432 bp,分别编码167和143个氨基酸.序列分析显示,CcLys-i1和CcLys-i2缺乏与催化活性相关的谷氨酸(E)和丝氨酸(S).同源性和聚类分析显示,CcLys-i1和CcLys-i2与斯氏珀蝽Plautia stali的i型溶菌酶相似性最高,分别为80.36％和48.95％.采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)解析CcL ys-i和CcLys-i2基因的时空表达谱,结果表明它们在九香虫不同发育阶段都有表达,CcL ys-i1在成虫中表达水平最高,而CcLys-i2在5龄若虫中表达水平最高;它们在所检测的成虫不同组织中都有表达,都在脂肪体中表达水平最高.九香虫被注射细菌后24 h,CcLys-i1和CcL ys-i2的表达显著上调;九香虫被饲喂细菌后,这两种基因的表达水平没有显著变化.九香虫的这两种i型溶茼酶基因的表达受到自身免疫机制的调控,可以被诱导而参与免疫应答,但不具有参与消化的功能.该研究为进一步明确九香虫i型溶菌酶基因的功能奠定基础.

关键词：九香虫;i型溶菌酶;时空表达;先天免疫;细菌诱导

所属期刊栏目：48

分类号：Q967(昆虫学)

资助基金：国家自然科学基金31560610

在线出版日期：2022-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：17-28