大麦条纹花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

大麦条纹花叶病毒Barley stripe mosaic virus(BSMV)是我国进境植物检疫性有害生物.为提高大麦条纹花叶病毒检测的灵敏度和特异性,缩短检测周期,根据该病毒不同分离株外壳蛋白(coat protein,CP)基因的保守序列设计特异性的引物和探针,建立了BSMV的实时荧光RT-PCR检测方法.结果 表明,本检测方法特异性强,对南方菜豆花叶病毒Southern bean mosaic virus (SBMV)、小麦线条花叶病毒Wheat streak mosaic virus (WSMV)、玉米褪绿斑驳病毒Maize chlorotic mottle virus (MCMV)、烟草环斑病毒Tobacco ring spot virus (TRSV)、菜豆荚斑驳病毒Bean pod mottle virus (BPMV)和番茄环斑病毒Tomato ringspot virus (ToRSV)6种病毒均无交叉扩增;且检测方法灵敏度高,对RNA模板的最低检测限达到5×10-4 ng/μL,与双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)和普通RT-PCR相比,本方法的灵敏度分别提高了10倍和100倍.此外,我们利用该方法对12批进口大麦进行检测,发现6批大麦中检出大麦条纹花叶病毒,占比约50％.总之,本研究建立的荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强等优点,适合于BSMV的快速检测.

关键词：大麦条纹花叶病毒;荧光定量PCR;大麦;RT-PCR;ELISA

所属期刊栏目：47

分类号：S435.123(病虫害及其防治)

资助基金：海关总署科研项目2020HK229

在线出版日期：2021-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：240-244