金龟子绿僵菌黏附素基因mad1的敲除及功能分析
金龟子绿僵菌能够寄生昆虫,也能与植物共生.黏附素MAD1是绿僵菌与宿主互作初期的黏附因子.已知它在昆虫的侵染和致病中起重要作用,但与植物的互作机制报道甚少.为了研究MAD1在绿僵菌与植物共生中的作用,我们通过同源重组构建了金龟子绿僵菌mad1敲除株,并检测了敲除株的生长、产孢、孢子萌发及毒力等生物学特性,进一步利用qRT-PCR分析了MAD1在调节花生免疫响应中的作用.结果 显示,与野生型菌株相比,敲除株产孢量降低了43.67%,分生孢子萌发中时为27.69 h,显著长于野生型菌株的13.43 h.敲除株对家蚕的半致死时间LT50为8.9d,较野生型菌株的7.62d显著延长.敲除株处理花生6h后,花生免疫类基因CNGC1、PCD4,抗病基因SWEET10及转录因子WRKY41、MYB86的转录水平出现显著上调,而钙调素CML5、CML19的转录表达受到明显抑制.本研究证明了mad1是金龟子绿僵菌产孢、孢子萌发及毒力的正相关基因,并且MAD1在金龟子绿僵菌与植物相互作用初期,抑制植物抗性级联反应,减弱过敏反应,降低对微生物的抵御能力,同时增强共生信号的传导,这些作用有助于金龟子绿僵菌在花生根组织上定殖.
金龟子绿僵菌;MAD1;基因敲除;共生;花生
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S476.12(各种防治方法)
国家重点研发计划;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;林业科技创新平台运行补助项目
2021-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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