适用于双向电泳分析的链格孢菌体蛋白提取方法的筛选

摘要：

为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电泳体系.结果 表明:TCA/丙酮-SDS/酚抽提法所获得的蛋白质浓度为15.9 mg/mL,分别是其他三种方法所得蛋白浓度的2.64、4.61和1.43倍;SDS-PAGE图谱中形成的条带数目最多、丰度最好;所获得的2-DE图谱背景清晰干净,无明显的横纵条纹,分辨率高,可辨别的蛋白质点数为1 138个,是TCA-丙酮法所分离蛋白点数的1.89倍.由此可知,TCA/丙酮-SDS/酚抽提法为链格孢菌蛋白提取的最优方法,该方法所提取的蛋白质适用于双向电泳分析及后续的蛋白质组学研究.

关键词：链格孢、采后病害、蛋白质提取、双向电泳、TCA/丙酮-SDS/酚抽提法

所属期刊栏目：45

分类号：S432.1(病虫害及其防治)

资助基金：宁夏自然科学基金NZ16087;北方民族大学重点科研项目2015KJ35

在线出版日期：2019-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：138-144