基于 ITS 与 factor 1-alpha 序列桉树焦枯病菌的双重 PCR 快速检测

摘要：

桉树焦枯病是威胁桉树生长的首要病害,建立准确、有效的桉树焦枯病的 PCR 快速检测技术是桉树焦枯病前期诊断的必要手段。试验以桉树焦枯病原菌(Calonectria morganii )DNA 为模板,分别以 ITS 和 factor 1-alpha序列为靶区域,针对 Calonectria 属和 C .morganii 设计了 CYS1/CYS2和 EF-S-1/EF-A-1两对特异性引物,建立了基于属和种的双重 PCR 快速检测技术。利用引物 CYS1/CYS2可以从全部 Calonectria 属的供试菌株中扩增出一条351 bp 大小的条带,单独用特异性引物 EF-S-1/EF-A-1进行 PCR 扩增,仅病原菌扩增出197 bp 的条带,同时使用2对引物时,病原菌可扩增出两条明亮条带。当体系退火温度为53℃时,DNA 灵敏度检测限度达到450 fg/μL。野外田间时效检测结果显示,该体系能准确检测出不同发病程度桉树组织上的病原菌,完全符合田间检测的要求。这是关于桉树焦枯病快速检测的首次报道。

关键词：桉树焦枯病、桉树焦枯病原菌、快速检测、PCR 扩增

分类号：S432.44(病虫害及其防治)

在线出版日期：2015-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：110-115