木薯细菌性萎蔫病菌的LAMP快速检测方法

摘要：

建立了一种木薯细菌性萎蔫病菌的环介导恒温扩增快速检测方法,为木薯细菌性萎蔫病的快速检测提供有力的技术支持.针对木薯细菌性萎蔫病菌TAL效应器蛋白质(pthBXam)靶序列的6个位点设计4条特异性引物,并对反应温度和内引物浓度等参数进行了优化,设计的引物与试验中提供的其他黄单胞近缘种都没有扩增反应,表现了较好的特异性.LAMP方法对木薯细菌性萎蔫病菌菌株DNA的检测下限为1 pg/μL,比常规PCR灵敏度高100倍.该方法采用SYBR Green Ⅰ染料法对扩增产物闭管检测,裸眼观察颜色变化判断反应结果,能快速、准确地对田间样品进行检测,没有出现假阳性和假阴性.与其他检测方法相比,LAMP方法检测时间短,效率高,降低了设备投入,易于操作,适合木薯细菌性萎蔫病菌的现场检疫和大规模监测.

关键词：木薯细菌性萎蔫病菌、环介导等温扩增、检测

所属期刊栏目：41

分类号：S432.41;S436.43(病虫害及其防治)

资助基金：国家质检总局科技计划项目2009IK254,2011IK286;“十二五”国家科技支撑计划2012BAK11B02;山东出入境检验检疫局科研项目2005SK09

在线出版日期：2015-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：93-99