菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用

摘要：

菠萝凋萎相关病毒-1（Pineapplemealybugwiltassociatedvirus-1，PMWaV-1）是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1 CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物，建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y＝－3．307×log x＋38．18，相关系数r2为0．998。试验结果表明，该方法能特异性地检测PMWaV-1，对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应；最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1．98％，是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。

关键词：菠萝凋萎相关病毒-1、TaqMan探针、实时荧光定量RT-PCR、检测

分类号：S436.67(病虫害及其防治)

资助基金：公益性行业农业科研专项201203021；海南省重大科技项目ZDZX2013020-3；海南省科学事业费项目琼财预[2013]131号；海南省重点科技计划应用研究及产业化项目ZDXM20130031；海南省自然科学基金琼科[2013]32号

在线出版日期：2014-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：116-121,125