褐飞虱SRAP-PCR体系的优化与确立

摘要：

采用L16(45)正交试验设计,对褐飞虱SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化,确立了褐飞虱SRAP-PCR最佳的反应体系.结果表明:褐飞虱SRAP-PCR最佳反应体系为:总体积10μL,Mg2+浓度3 mmol/L、dNTPs为150 μmol/L、TaqDNA聚合酶2U、正反向引物各0.3 μmol/L、DNA用量25 ng以及1×PCR Buffer.使用生物型1雌虫与生物型2雄虫单对杂交F2群体对优化后的褐飞虱SRAP-PCR反应体系进行验证,获得了条带清晰、多态性丰富的图谱,并发现共显性条带,表明确定的反应体系稳定可靠.

关键词：褐飞虱、SRAP-PCR、正交试验、反应体系优化

所属期刊栏目：40

分类号：S435.112.3(病虫害及其防治)

资助基金：湖北省自然科学基金重点项目2011CDA077

在线出版日期：2014-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：103-108