葡萄霜霉病菌PCR检测方法的建立与应用

摘要：

通过对已测序和已报道的葡萄霜霉病菌[Plasmopara viticola (Berk et Curtis) Per.et de Toni]细胞色素c氧化酶亚型2(cytochrome c oxidaseⅡ,cox2)的基因序列进行同源性比对分析,设计合成了一对用于P.viticola的检测引物F-Pv/R-Pv.利用该引物对包括P.viticola在内的30种常见植物病原真菌(包括15种Plasmopara属真菌、8种葡萄常见致病菌)的基因组DNA进行了PCCR扩增,验证引物F-Pv/R-Pv的特异性,结果表明:该引物特异性强,仅P.viticola基因组DNA作为模板的PCR扩增产物呈现一条600 bp左右的特异性条带,其他参照菌株及阴性对照均无任何条带;灵敏度验证结果表明,该检测法可以检测出3.3 pg/μL水平的P.viticola基因组DNA;应用该方法对来自全国不同葡萄产区的不同品种的78份葡萄霜霉病菌进行了检测,结果表明,该检测法适用范围广,且检测准确率达100％.

关键词：葡萄霜霉病菌、cox2、聚合酶链式反应、检测

所属期刊栏目：40

分类号：S436.631(病虫害及其防治)

资助基金：公益性行业农业科研专项201203035;国家现代农业产业技术体系专项基金nycytx-30

在线出版日期：2014-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：99-102,108