甘蔗VAMP相关蛋白ScPVA12与甘蔗花叶病毒P3N-PIPO的互作研究

摘要：

植物囊泡膜蛋白相关蛋白PVA12(plant vesicle-associated membrane protein(VAMP)-associated proteins homolog 12)属于VAP27 家族蛋白,在细胞中介导内质网囊泡运输以及膜融合.甘蔗(Saccharum spp.hybrid)PVA12 应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道.本研究从栽培种新台糖 22 号(ROC22)中克隆了PVA12 基因,命名为ScPVA12.该基因开放读码框(open reading frame,ORF)的长度为 735 bp,其编码长度为 244 aa的蛋白.生物信息学分析表明,ScPVA12 是一种不稳定的亲水性脂溶蛋白,C端具有跨膜结构域;二级结构中无规则卷曲占比最高;进化树分析表明,该蛋白在单子叶和双子叶植物中存在明显分化.酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)试验表明,ScPVA12 与SCMV-P3N-PIPO蛋白互作.亚细胞定位试验表明ScPVA12 定位于内质网.共定位试验表明ScPVA12 与SCMV-P3N-PIPO共定位于内质网.实时荧光定量PCR分析发现,ScPVA12 基因在甘蔗各组织中均有表达,在第 8 节间中的表达量最低,在正七叶中的表达量最高;SCMV侵染对ScPVA12 基因表达影响显著,在SCMV胁迫下ScPVA12 基因先下调表达,后期恢复正常水平.

关键词：PVA12、甘蔗花叶病毒、P3N-PIPO、蛋白互作

所属期刊栏目：49

分类号：X188;R735.7;R363

在线出版日期：2023-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：2472-2484