基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建
利用CRISPR/Cas9技术对调控水稻产量千粒重基因TGW6定点编辑，获得了一套有重要育种价值的tgw6突变体。设计了分别由U3、U6a和U6b启动子驱动、长20 bp的guide RNA (gRNA)靶点以靶向编辑TGW6基因的外显子，首先将这3个靶点一起组装到 pYLCRISPR/Cas9-MT(I)载体上，然后利用农杆菌介导侵染水稻材料 H447(R819/玉针香//R819的BC3F6)；提取T0代转基因植株的基因组DNA并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析。结果表明， T0代材料中tgw6的突变频率高达90%，其中纯合缺失突变率约占51%。对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明，部分tgw6的缺失突变能显著提高千粒重(大于5%)。不同类型tgw6突变体的成功创建不仅丰富了tgw6的变异类型，为水稻的高产稳产奠定了重要的材料基础，还证实了CRISPR/Cas9技术在水稻基因工程育种中高效、易操作的特点。
水稻、基因编辑、CRISPR/Cas9、TGW6、千粒重
42
S56;S51
广东省公益研究与能力建设转型项目20150209;国家高技术研究发展计划863计划项目2011AA10A101;国家现代农业产业技术体系建设专项CARS-01-12资助。 This study was supported by Public Welfare Research and Capacity Building Transformation Funds in Guangdong20150209;the National High Technology Research and Development Program of China 863 Program2011AA10A101;the China Agricultural Research Sys-temCARS-01-12
2016-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1160-1167
