利用酵母双杂交系统筛选花生AhCaM相互作用蛋白
CaM是目前已知的胞内Ca2+受体蛋白中最重要的一种,参与多种生理活动的调节。为深入研究CaM蛋白的作用机制,探索其在花生钙信号途径中的作用靶点,用花生 CaM 基因构建了既无自激活性又无毒性的pGBKT7-AhCaM诱饵表达载体；同时从花生叶片组织中提取总RNA,分离得到mRNA,利用SMART技术合成并纯化双链 cDNA 后建立花生叶片 cDNA 文库；通过共转化法筛选与 CaM 相互作用的蛋白,并对阳性克隆分析和鉴定,筛选到5个与 AhCaM 互作的蛋白,其中 NAD 激酶是已知能与钙调素互作的蛋白；而泛素能与 AhCaM 互作,说明AhCaM 在花生发育及抗逆方面起作用。通过分析这些靶蛋白的已知功能,为研究 AhCaM 的未知生物学功能提供了重要信息。
花生叶片cDNA文库、AhCaM、泛素、酵母双杂交系统、蛋白质相互作用
R39;R73
国家科技支撑计划项目2014BAD11B04;山东省农业重大应用技术创新项目,山东省自主创新成果转化重大专项2012ZHZXIA0418;山东省自然科学基金项目ZR2011CQ042;山东省农业科学院科技创新重点项目2014CXZ06-6;国家现代农业产业技术体系建设专项CARS-14;山东省良种产业化工程项目和国家国际科技合作专项2015DFA31190资助。
2015-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1056-1063
