高粱中SbDREB2基因的克隆与表达分析

摘要：

干旱应答元件结合蛋白(DREB)在植物非生物逆境胁迫中调节下游一系列抗逆基因的表达.本研究利用电子克隆和RT-PCR方法从高粱中克隆到1个DREB类基因SbDREB2,该基因ORF 789 bp,推测编码蛋白含262个氨基酸残基,相对分子质量28.6 kD,理论等电点为5.52,在DNA序列内包含1个740 bp的内含子,符合GT-AG剪接规则.氨基酸序列分析表明,该蛋白在82～145区含有DREB类转录因子家族特有的AP2保守结构域,与玉米DREB2A及水稻DREB1蛋白相似度分别为84％和69％.成功构建了原核表达载体pET28a-SbDREB2,经IPTG诱导获得32.5kD左右蛋白,与理论值一致.Real-time PCR表达特性分析显示,该基因为组成型表达,在根、茎、叶中均表达,根中表达量约是茎中的2.5倍;受干旱、高盐和外源ABA的强烈诱导,但对低温几乎没有响应.

关键词：高粱、SbDREB2、原核表达、胁迫处理、荧光定量PCR

所属期刊栏目：39

分类号：S43;S33

资助基金：河北省自然科学基金2008000340

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1352-1359