芥菜AP1基因体外表达及其与FLC相互作用的验证
芥菜花分生组织决定因子AP1与开花路径核心调节子FLC可能存在直接的相互作用,从而调节开花时间.为进一步检测该相互作用,从芥菜“QJ”材料中同源克隆了790 bp的AP1 eDNA序列,该基因编码256个氨基酸.生物信息学分析表明,AP1属MIKC型蛋白,其MADS域含有2个α 螺旋和2个β折叠,第1个0螺旋内含有1个不保守氨基酸位点;而K域含有3个α螺旋,第1、2个0 螺旋内各有1个不保守位点,第3个α螺旋内具有4个不保守位点.同时构建了原核表达质粒pET43.1a-AP1,转化宿主菌大肠杆菌BL21,以IPTG诱导该融合蛋白体外表达.利用pET43.1 a-APl融合蛋白序列中6×His标签与Ni+结合的特点,结合SDS-PAGE分析,证实了体外表达蛋白AP1能与FLC相互作用并形成复合体,该结果为深入研究AP1与FLC互作机制及花分生组织的分子调控奠定了基础.
芥菜、AP1基因、FLC、蛋白互作
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R73;R34
国家自然科学基金项目31000908;中央高校基本科研业务费专项资金XDJK2009C124,XDJK20128020;重庆市自然科学基金2009BB1307,2011BA1002;国家重点基础研究发展计划973计划项目2012CB1139000
2012-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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