小麦ERF转录因子W17互作蛋白的筛选和解析

摘要：

来自小麦的ERF转录因子W17基因参与胁迫应答,过表达W17可显著提高转基因拟南芥的抗旱性和抗病性.本研究构建了小麦cDNA文库,通过酵母双杂技术筛选W17的互作蛋白,进一步解析ERF蛋白的作用机制.将pGBKT7-W17质粒、pGADT7和小麦文库混合转入酵母细胞AH109,在SD/-Trp/-Leu/His/-Ade营养缺陷型平板上培养,挑选直径大于2 mm的克隆,在SD/Raf/Gal/X-gal平板上划线培养,筛选蓝色克隆.将筛出的克隆测序、BLAST分析,得到4类与w17相互作用的候选蛋白,分别是胁迫相关功能蛋白、翻译后修饰蛋白、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)大亚基/小亚基以及功能未知蛋白.互作验证表明,HSP90和PPR蛋白与W17有相互作用关系.这些候选蛋白参与信号转导或免疫过程,暗示W17在植物的逆境信号转导、下游基因转录调控,甚至在翻译过程都有重要作用.

关键词：酵母双杂交系统、ERF、蛋白互作、信号转导、小麦

所属期刊栏目：37

分类号：R73;R74

资助基金：国家自然科学基金项目30700504;国家转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08009-083B和2009ZX08002-008B

在线出版日期：2011-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：803-810