表达大豆GMCHI基因能够提高原核生物耐低温性

摘要：

低温是种子萌发过程中常见的自然灾害,在我国北方经常发生,这导致种子萌发率较差、降低植株活力等后果.利用cDNA-AFLP技术从低温(4℃)吸胀24 h的抗低温吸胀大豆品种中黄22(低温吸胀24 h对萌发率无影响的品种)中分离出一个基因片段,命名为GMCHI(GenBank登录号为EU699765),通过RACE方法得到全长为387 bp的cDNA序列.在NCBI数据库中的查询表明,GMCHI基因和数据库记录的基因序列同源性较低,因此可以断定GMCHI是在大豆中被发现的新基因.半定量RT-PCR显示GMCHI受ABA和PEG诱导.该基因与PET30A连接后转入原核细胞,经过IPTG诱导,6%SDS-PAGE电泳条带说明,GMCHI在大肠杆菌中能够表达.把诱导表达和非诱导表达的菌落在-20℃下2 h后,移至37℃培养20 d,发现对照的菌落完全死亡,而诱导表达GMCHI的菌落只有部分死亡,并长出新菌落.RT-PCR检测表明新菌落携带GMCHI基因,证明GMCHI基因的表达提高了大肠杆菌的低温耐性.

关键词：大豆、GMCHI、菌落、cDNA.AFLP、基因、低温

所属期刊栏目：35

分类号：S43;TS2

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划项目2002CB111302

在线出版日期：2009-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1156-1160