农杆菌敏感小麦基因型的筛选及其转化

摘要：

利用C58c1农杆菌菌株(其携带的pPTN290质粒载体上含有nptⅡ基因和GUS基因)为供体材料和小麦幼胚为受体材料,对我国35个春小麦基因型进行了农杆菌敏感性研究和转化研究.组织化学染色结果表明,PM97034、P187、巴140105、扬麦158、新春9号和克丰6号等基因型农杆菌感染后GUS,基因瞬时表达率达到了15.0% ～ 30.0%,显著高于模式基因型Bobwhite.其余幼胚分别在含10～25 mg/L G418培养基上诱导愈伤组织和分化植株,抗性再生植株经ELISA检测、PCR检测、叶片离体退绿检测、X-Gluc染色检测和Southern blot检测,最终从新春9号、PM97034和Bobwhite获得了转基因植株,转化效率分别为3.3%、2.0%和1.1%,新春9号和PM97034的农杆菌转化效率高于Bobwhite.Southern blot检测结果同时表明,外源基因在多数转基因植株中表现为单拷贝整合.T1代植株ELISA检测结果和PCR检测结果表明,外源基因在个别株系中的分离符合孟德尔遗传规律,而在多数株系中的分离偏离了孟德尔遗传规律.阳性植株与阴性植株分离比经χ2c适合性检测,表明外源基因在多数株系中的遗传符合3∶1分离规律.本文首次对不同小麦基因型进行了农杆菌敏感性和转化效率研究,筛选到新春9号和PM97034两个对农杆菌比较敏感且转化效率比较高的基因型,可望广泛用于小麦转基因研究.

关键词：小麦、农杆菌转化、基因型筛选、瞬时表达、分子检测

所属期刊栏目：31

分类号：S512(禾谷类作物)

资助基金：the National Special Program for Research and Industrialization of Transgenic PlantsJY03-B-22;国家重点基础研究发展计划973计划2002CB1130

在线出版日期：2006-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1552-1556,后插1