影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究

摘要：

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)],在非免疫鸡胚上增殖后,用蔗糖透析法浓缩10倍,再分别采用三种方法处理,制备IBV-HA抗原:1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R.W.F.C4)处理IBV;2)用2.5U/mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV;3)用1%胰酶处理IBV.结果显示,除T株仍不具有血凝性外,其余毒株都有了较高的血凝价.IBVM41株、X株HA效价株高达28,Fu、Gray、W、H株的HA效价也达27-29.但是,用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值.因为1%胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用,非特异性HA价高达8log2.而采用R.W.F.C4和2.5U/ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV-HA抗原,除T株外,均能凝集鸡红细胞,且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制,而不能被ND、EDS-76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制,说明该抗原具有较强的特异性.本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究.比较了用R.W.F.C4和用2.5U/mlPLC1处理IBV制备HA抗原血凝价,结果显示二者的血凝价是一致的,所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液.本试验还采用IBV-M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV-HA双价抗原,结果表明,用上述IBV-HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV-HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著,说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛,可用于IB的免疫监测和诊断.本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC-SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较,结果经统计学分析表明:HI效价与CEKC-SN效价呈正相关,相关系数为0.6585,且HI法比ECKC-SN法省时、省力.

关键词：鸡传染性支气管炎病毒、家兔A型魏氏梭菌培养液、PLC1(I型磷酸酯酶)、HA抗原、HI效价、血凝特性

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4-10