高效液相色谱-同位素稀释质谱法准确定量牛乳中β-乳球蛋白
β-乳球蛋白(β-LG)是牛乳的主要致敏蛋白之一,亟需开发一种准确且可追溯的准确定量分析方法.本研究利用胰蛋白酶酶解β-LG后,采用同位素稀释质谱(IDMS)法对特定多肽进行定量分析.同时考察氘标记特征多肽IDAL*NENK(D6-Leu)及碳氮双标记特征多肽IDAL*NENK(13C6,15N-Leu)作为内标对色谱行为和检测结果的影响,并进行方法学验证.结果表明,本方法的回收率为90.1% ~102.7%,变异系数(CVs)<8.0%.分析来自国内市场的5个样本,CVs<6.5%,合成成本较低的氘标记多肽在蛋白质定量中可作为13 C、15 N标记多肽的可靠替代.本方法抗干扰能力强、灵敏度高、准确度高、重现性好,有助于提高β-LG定量结果在不同实验室之间的可比性.
液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)、β-乳球蛋白(β-LG)、同位素稀释质谱(IDMS)、特征多肽
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O657.63(分析化学)
2023-06-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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