dTDP-L-鼠李糖生物合成路径的电喷雾多级串联质谱法表征

摘要：

本研究以2'-脱氧胸苷-5'-二磷酸-L-鼠李糖(dTDP-L-Rha)生物合成路径涉及的系列酶促反应产物为研究对象,建立了电喷雾碰撞诱导解离串联质谱(CID-ESI-MSn)对罕见单糖生物合成路径的表征方法.该方法首先通过ESI-MS技术分析2'-脱氧胸苷-5'-二磷酸-D-葡萄糖-4,6-脱氢酶(RmlB)、2'-脱氧胸苷-5'-二磷酸-4-酮-6-脱氧-葡萄糖-3,5异构酶(RmlC)和2'-脱氧胸苷-5'-二磷酸-4-酮-鼠李糖还原酶(RmlD)酶活产物的形成,随后应用CID-ESI-MSn技术对酶促反应终产物L-鼠李糖(dTDP-L-Rha)的结构进行表征.结果表明:dTDP-L-Rha的生物合成始于2'-脱氧胸苷-5'-二磷酸-D-葡萄糖(dTDP-D-Glc),依次涉及RmlB、RmlC和RmlD三个酶的参与.这与传统的高效液相色谱法(HPLC)监测、纯化制备,核磁共振(NMR)及ESI-MS结构表征的分析结果一致.该方法简单、灵敏、快速,适用于重要罕见单糖生物合成路径的表征.

关键词：罕见单糖、dTDP-L-鼠李糖、生物合成路径、电喷雾串联质谱(ESI-MS/MS)

所属期刊栏目：37

分类号：O657.63(分析化学)

资助基金：南开大学引进人才科研启动资金J02006

在线出版日期：2016-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：17-22