10.3969/j.issn.1672-4321.2014.01.008
鱼腥藻铁调蛋白基因(alr0957)表达和Fe3+对藻生长的影响
根据CyanoBase提供的鱼腥藻PCC7120 FurC基因( alr0957)序列信息设计特异性引物,用降落PCR法从染色体DNA中扩增得约450 bp目的片段.运用TA克隆将其连接到pMD18-T载体上,经筛选测序获得阳性重组质粒.再经过双酶切、纯化FurC基因,连接原核表达载体pET-28a(+),并转化表达菌株BL21和IPTG诱导表达.经测序鉴定的阳性菌株中的FurC,运用SDS-PAGE检测重组蛋白,并利用镍柱层析法纯化目的蛋白.由藻细胞密度、叶绿素a含量、可溶性糖含量等改变探讨不同Fe3+浓度对藻类生长的影响.结果表明:在37℃经1 mmol/L IPTG诱导18 h,成功表达了分子量约为19000的融合蛋白.小于0.5mg/L Fe3+促进藻生长,大于0.9 mg/L Fe3+抑制藻生长,最适藻生长Fe3+浓度为0.5~0.9 mg/L.
鱼腥藻PCC 7120、铁调蛋白基因、Fe3+浓度
TQ032.4(一般性问题)
国家自然科学基金资助项目31001099/C190101;中央高校自然科学基金资助项目 CJSl3003,CJS13004;中南民族大学微生物与生物转化重点实验室资助项目XJS09002
2014-04-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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