樟叶越桔热激蛋白基因对温度胁迫的响应表达

摘要：

[目的]分析樟叶越桔热激蛋白基因响应不同温度变化的表达模式,为阐明热激蛋白在樟叶越桔响应温度胁迫过程中的生物学功能奠定理论基础.[方法]以樟叶越桔成熟叶片为材料,从建成的转录组数据库中筛选出候选内参基因(VdARP、VdGAPDH和VdEF-1α)和热激蛋白基因(VdHSP90、VdHSP70和VdsHSP)的cDNA序列,利用RT-qPCR技术检测目的基因在不同温度(4、25和35℃)、不同时间(1、5、10和15 d)处理下的表达情况.应用软件BestKeeper、GeNorm、Normfinder和RefFinder综合分析3个候选内参基因的表达稳定性,以表达最稳定的内参基因作为参照,分析3个热激蛋白功能基因响应不同温度的表达模式.[结果]软件BestKeeper、GeNorm、Normfinder和RefFinder综合分析显示,3个候选内参基因表达稳定性为VdARP>VdGAPDH>VdEF-1α,因此以VdARP为内参基因分析热激蛋白基因的表达情况.试验中3个热激蛋白基因在25℃各时间处理组中的表达水平整体趋于稳定.4℃和35℃处理均能诱导樟叶越桔VdHSP90和VdHSP70基因在一定时间内表达水平显著增加,但VdHSP90和VdHSP70基因受4℃诱导表达的水平分别显著高于35℃.VdsHSP基因受35℃高温诱导后显著上调表达,但显著受到4℃低温的抑制而下调表达.[结论]3个热激蛋白基因VdHSP90、VdHSP70和VdsHSP在不同温度(4、25和35℃)处理的樟叶越桔叶片中均有表达,其表达水平显著受到高、低温胁迫的影响.VdHSP90和VdHSP70基因表达在高、低温度胁迫下均显著上调,且对低温胁迫的响应更显著;而VdsHSP基因仅在高温度胁迫下显著上调表达.显示HSP90和HSP70基因表达产物在樟叶越桔抵御零上低温胁迫过程发挥重要功能,而sHSP基因表达产物则主要参与了樟叶越桔对高温胁迫的响应过程.

关键词：樟叶越桔;温度胁迫;内参基因;热激蛋白;基因表达

所属期刊栏目：42

分类号：S759.82(森林经营学、森林计测学、森林经理学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;云南省高校林木生物技术重点实验室开放基金项目

在线出版日期：2022-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：139-146,168