诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

摘要：

为了解决诺丽实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成cDNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到pMD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序.序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96％)和相似性(98％).qRT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在诺丽基因表达研究中作为内参基因.

关键词：基因克隆、内参基因、序列分析、表达分析

所属期刊栏目：38

分类号：S718.46(林业基础科学)

资助基金：云南省自然科学基金2016FB049;中西部高等学校青年骨干教师国内访问学者项目;国家林业局推广项目[2015]27

在线出版日期：2018-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：16-22