10.14067/j.cnki.1673-923x.2016.04.009
桉树无性系叶片蛋白质组双向电泳体系优化
为了建立适用于桉树叶片蛋白质组研究的双向电泳体系,以尾叶桉Eucalyptus urophyllas广林4号无性系作为试验材料,对蛋白质样品获取方法、双向电泳等电聚焦胶条pH范围、蛋白质上样量、胶条平衡条件以及染色方法进行了优化。结果表明:提取液+酚抽提法最适合桉树叶蛋白质的提取,电泳图谱可检测到850个蛋白质点。7 mol/L尿素+2 mol/L硫脲+4% Chaps+60 mmol DTT 10μL的蛋白质干粉裂解液,裂解效果较好;使用50 mg蛋白质干粉和600μL裂解液所获得的蛋白质浓度较高,为3.97μg/μL。使用 pH4~7、24 cm IPG胶条,蛋白质上样量为1200μg,并加入375 mg碘乙酰胺,采用考马斯亮蓝染色,获得的蛋白点清晰,没有拖尾现象,条纹极少,分布较均匀。
桉树、叶片、蛋白质组、无性系、双向电泳
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S792.39(森林树种)
国家自然科学基金31070560
2016-06-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
45-50