钩栗 ISSR-PCR 反应体系的建立与优化

摘要：

本研究以钩栗叶片为实验材料，采用单因素和 L16(45)正交实验探讨了 DNA 模板用量、Mg2+浓度、引物用量、Taq DNA 聚合酶、dNTP 用量以及不同退火温度对钩栗 ISSR-PCR 扩增的影响，建立了钩栗 ISSR-PCR反应体系。研究结果显示，优化后的最佳反应体系为，20μL 反应总体系中，含30 ng 模板 DNA，3 mmol/L Mg2+，0.4 mmol/L dNTPs，0.75 U Taq DNA 聚合酶，0.3μmol/L 引物；对钩栗 DNA 样品材料进行 ISSR-PCR 扩增体系的检测结果显示，该优化体系扩增的产物条带清晰，稳定性高，本研究为钩栗种质 ISSR 分子标记遗传结构分析提供技术基础。

关键词：钩栗、ISSR-PCR、正交设计、单因素试验、优化

分类号：S792.17(森林树种)

资助基金：国家林业行业公益性项目“珍贵树种钩栗良种选育及栽培关键技术研究”201204405

在线出版日期：2015-02-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：32-37