尾叶桉GLU4肉桂酰-辅酶A还原酶基因克隆及原核表达

摘要：

肉桂酰-辅酶A还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase，CCR)是木质素合成中的关键酶，根据植物中CCR保守序列设计引物，以尾叶桉GLU4嫩茎为材料克隆到其CCR基因，命名为EuCCR。该基因gDNA长2918 bp，cDNA长1045 bp，CDS区编码336个氨基酸。EuCCR核酸序列与GenBank已登录的桉属植物CCR基因同源性达到96%以上，与伞房属、杯果木属植物CCR的同源性达85%以上，其编码的氨基酸序列经比对发现具有完整FR_SDR_e结构域及NADP结合位点和底物结合位点，与可可树等植物中CCR基因编码序列同源性也在84%以上，确定为CCR基因。对EuCCR蛋白序列理化性质及结构进行生物信息学分析，利用MEGA软件对基因序列进行系统进化树分析。采用pQE30/M15系统对EuCCR进行原核表达，重组质粒成功表达分子量约36 kD的目的蛋白。本研究从尾叶桉GLU4中克隆得到EuCCR基因并原核表达，为该基因的酶学分析以及利用该基因转化调控尾叶桉木质素合成奠定基础。

关键词：尾叶桉、肉桂酰-辅酶A还原酶、生物信息学分析、原核表达

分类号：S792.39(森林树种)

资助基金：国家自然科学基金;广西壮族自治区林业科技项目;广西优良用材林资源培育重点实验室开放基金

在线出版日期：2014-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：71-76,97