赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

为建立适宜于赤皮青冈ISSR分析的扩增体系，以赤皮青冈叶片基因组DNA为材料，采用单因素和正交设计相结合的方法系统地测试模板DNA、Mg2+、引物、磷酸碱基脱氧核苷（dNTPs）浓度，Taq DNA聚合酶用量和退火温度这6个因素对ISSR-PCR反应结果的影响。综合分析表明：优化后的最佳反应体系为20μL反应总体系中，含20 ng模板DNA，2.5 mmoL/L Mg2+，0.2 mmoL/L dNTPs，1.0 U Taq DNA聚合酶，0.2μmoL/L引物；UBC 808号作引物最佳退火温度为59.3℃。这一优化体系的建立为进一步开展赤皮青冈遗传多样性的ISSR分析奠定了基础。

关键词：赤皮青冈、ISSR-PCR、正交设计、单因素试验、优化

分类号：S723.7(造林学、林木育种及造林技术)

资助基金：“十二五”国家科技支撑项目“楸树和赤皮青冈珍贵用材林定向培育技术研究与示范”2012BAD21B03

在线出版日期：2014-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：61-65,80