10.3969/j.issn.1673-923X.2014.06.006
赤桉木质素合成途径OMT基因家族的原核表达与纯化研究
双子叶植物的木质素主要由愈创木基单体和紫丁香基木质素单体聚合形成,这两种单体的比例对造纸过程中木质素去除难易程度具有重要的影响。植物OMT基因家族的CCoAOMT和COMT基因是木质素合成途径的关键酶基因,可调控植物体内木质素单体的比例与含量。本文以所克隆的赤桉COMT、CCoAOMT1、CCoAOMT2三个基因的cDNA为模板,分别构建pET-32a的原核表达质粒,并优化在大肠杆菌BL21(λDE3)中的表达体系。结果显示,在加入0.4 mmol IPTG诱导表达后,COMT、CCoAOMT1、CCoAOMT2的原核表达质粒分别在4h、2h和3h后达到可溶性重组蛋白表达峰值。通过渗透休克纯化方法,可在原核表达菌株的周质空间提纯CCoAOMT1和CCoAOMT2重组蛋白,在原核表达菌株的细胞质中可提纯COMT重组蛋白。
赤桉、木质素合成、OMT基因家族、原核表达
S781.29(森林采运与利用)
湖南省研究生科技创新项目;中南林业科技大学研究生科技创新项目
2014-08-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
24-27,60